制備液相色譜技術(shù)(Preparative High Performance Liquid Chromatography, PHPLC),是一種在化學(xué)、制藥、生物技術(shù)等領(lǐng)域中廣泛使用的分離和純化方法。
制備液相色譜儀的使用注意事項(xiàng):
1.流動(dòng)相選擇:
-流動(dòng)相應(yīng)采用色譜純?nèi)軇?,避免使用有污染的水等沖洗色譜柱。
-嚴(yán)禁使用不相溶的溶劑,避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi)。
-流動(dòng)相需經(jīng)過(guò)濾、除氣后方可使用,以避免柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥等部件的磨損。
2.色譜柱維護(hù):
-避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。
-調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以防止沖動(dòng)柱內(nèi)填料。
-一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖,除非生產(chǎn)者指明該柱可以反沖。
-選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。
-定期對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗和保養(yǎng),以延長(zhǎng)其使用壽命。
3.儀器操作:
-嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行操作,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
-注意儀器的日常維護(hù)和校準(zhǔn),確保儀器的正常運(yùn)行和數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
-在使用新色譜柱前,應(yīng)檢查柱中當(dāng)前是何種溶劑,并確保其與分析樣品所用流動(dòng)相互溶。
-在梯度洗脫時(shí),要注意溶劑的互溶性,避免產(chǎn)生沉淀或析出鹽的微細(xì)晶體。
4.安全防護(hù):
-使用有毒或腐蝕性化學(xué)品時(shí),應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。
-確保實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好,以避免有害氣體的積聚。
-遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)定,妥善處理廢液和廢棄物。
制備液相色譜的測(cè)定步驟包括準(zhǔn)備、裝柱與平衡、上樣與分離、檢測(cè)與收集以及數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié)。在使用過(guò)程中需要注意流動(dòng)相的選擇、色譜柱的維護(hù)、儀器的正確操作以及安全防護(hù)等方面的問(wèn)題。